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细胞处理方法


细胞处理方法
一、         贴壁细胞
1.    接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.    用75%的酒精**(建议配置75%的酒精的水是**过的)。
3.    严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.    将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.    用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.25%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.    1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.    换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
二、         悬浮细胞
1.    接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.    用75%的酒精**(建议配置75%的酒精的水是**过的)。
3.    严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.    细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。
5.    1000rpm,5min离心,重悬细胞。
6.    换新的细胞培养瓶和新鲜培养基,37℃,5%CO2培养。

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